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核酸提取亚洲十大信誉彩票平台官网的基因组DNA提取方法SDS法

核酸提取亚洲十大信誉彩票平台官网的基因组DNA提取方法SDS

一、SDS法原理:

SDS是一种阴离子洗涤剂,在高温( 55-65 )下分解细胞,分离染色体,改变蛋白质,释放核酸。提高高盐( NH4AcKAc )的浓度,降低温度(冰浴),沉淀蛋白质和多糖类杂质,离心去除沉淀。用苯酚或氯仿萃取上清液中的DNA,重复萃取后,用乙醇沉淀水相中的DNA

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二、SDS提取缓冲液的配方以及作用

1、终浓度50mM Tris-HCL(pH 8.0)

作用: tris-HCl ( ph8.0)为防止核酸被破坏提供了缓冲环境。

2.终浓度20mM EDTA(pH 8.0)

作用: EDTA螯合锰离子或镁离子抑制DNase活性。

3.终浓度0.4M NaCl

作用: NaCl提供高盐环境,充分溶解DNP,存在于液相中。

4.终浓度2SDS

作用: SDS在高温( 55-65 )下分解细胞,改变蛋白质,释放核酸。

三、核酸提取亚洲十大信誉彩票平台官网的SDS法实验流程

动物组织液氮研磨或匀浆细胞裂解-萃取-上层溶液-醇沉淀-离心洗涤-干燥溶解-DNA溶液

四、核酸提取亚洲十大信誉彩票平台官网的SDS法应用

SDS法提取动物组织、细胞、全血、细菌、酵母等大部分实验材料基因组DNA

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